微細藻類は、生分解性ポリマー、特にPHA（ポリヒドロキシアルカノ酸）ファミリーに属するポリヒドロキシ酪酸（PHB）の持続可能な合成のための魅力的な生物学的プラットフォームを提供すると考えられている。従来のプラスチックに関連する環境問題の増大に伴い、高PHB産生微細藻株を見いだすための迅速かつ正確なスクリーニング技術が必要である。細胞内での高分子蓄積の初期同定には、従来の分析手法の経済的かつ有効な代替として、染色に基づく手法が用いられる。本研究は、イエメンにおける最初の試みとして、微細藻類におけるPHB蓄積の検出に関して、Nile Red、Nile Blue A、Sudan Black Bの3種類の染色アプローチの性能を評価し、比較することを目的とした。Nile Redは細胞内の疎水性化合物を迅速に可視化するために用いられ、Nile Blue Aは染色条件を最適化したもとでPHB顆粒をより選択的に同定するために適用された。Sudan Black Bは、光学顕微鏡によって脂質および高分子的な内包物を補完的に質的評価することを可能にした。上述の結果に従うと、DMSOに溶解したNile Blue Aは陽性の最も高い割合で100%を示し、次いでDMSOに溶解したNile Redは陽性割合98.2%であり、その後、アセトンに溶解したNile Blue Aは陽性割合92.79%であった。さらに、オレンジ色の顆粒として観察された、アセトンに溶解したNile Redは陽性割合88.29%であった。そして最後に、エタノールに溶解したSudan Black Bは青黒色の顆粒として観察され、全ての染色の中で最も低い割合40.54%を示した。しかし付録の画像に見られるように、陰性所見ではピンク色または赤色の顆粒や細胞が認められた。サンプルのリード数を計算したところ、37検体中32検体が陽性であり、試験した藻類細胞の内部に生体高分子が蓄積している割合は86.49%であった。これらの検体は、他のバイオテクノロジー応用に用いるために選択された。
https://doi.org/10.20944/preprints202609.0162.v1