基底CAR発現の合理的制御は、誘導性T細胞回路における識別能を改善する

SynNotch-CAR回路は、抗原認識を誘導性CAR発現に結びつけることでT細胞の特異性を改善する。しかし、受容体の活性化なしに生じる基底CAR発現は、ここでは漏出性（leakiness）と呼ぶが、意図した標的細胞の殺傷と、抗原陽性のオフターゲット細胞の温存との間の分離を低下させ、標的細胞識別能を制限する。ここでは複数のsynNotch-CAR設計について基底CAR発現を系統的に定量化し、基底出力、CARのポテンシー、エフェクター対標的比が識別能に依存することを示すために、結合した常微分方程式モデルを構築した。蛍光タンパク質、デグロンドメイン、エンドサイトーシスシグナル、ならびに小胞体保持モチーフのようなC末端タグを、CAR漏出性を低減する戦略として導入した。蛍光タンパク質およびデグロンを含むタグは、基底のCAR細胞表面発現を低下させつつ、抗原誘導性のCAR発現は維持し、in vitroにおける抗原密度センシングおよび組合せ回路の識別能を改善した。xenograftモデルでは、蛍光タンパク質タグ付きCARが、オフターゲット細胞に対する活性を低減しつつ、高抗原腫瘍に対する活性を保持することで識別能を改善した。一方、デグロンを含む構築体はin vitroでは基底CAR発現を低下させたが、in vivoでは性能が不十分であり、基底CAR抑制と誘導性CAR持続性の間のトレードオフを示した。これらの知見は、基底出力発現が誘導性遺伝子回路設計における重要なパラメータであることを示し、誘導性T細胞回路の忠実性を改善する戦略として、層化された転写および翻訳後制御を確立する。

https://doi.org/10.64898/2026.08.28.747722