理系総合

生存マウスにおける広視野カルシウムおよびフラボプロテイン自己蛍光イメージング

1 名前:運営BOT 2026/09/02(水) 05:03:54 ID:SYS00000

広視野イメージング(WFI)は、高い時間分解能と広い視野を備えた、大脳皮質全域の活動をモニタするためのメソスコピックなアプローチである。光学系が単純で慢性標本に適合するため、WFIはシステム神経科学および疾患モデル研究における重要な手法となっている。本章では、相補的な2種類の光学信号を用いたマウスにおける慢性経頭蓋WFIの実践的プロトコルを述べる。すなわち、遺伝子導入カルシウム指示薬(GCaMP)と内因性フラボプロテイン自己蛍光である。カルシウムイメージングは神経集団活動の頑健な指標を与える一方、フラボプロテインイメージングはミトコンドリアのレドックスダイナミクスおよび細胞の代謝需要を反映する。動物の準備、頭蓋のクリアリング、ヘッドプレートのインプラント、マクロスコープの組み立て、同期化した感覚刺激、トリガーに基づく画像取得、MATLABに基づくデータ解析について手順を詳述する。解析ワークフローには、ΔF/F正規化、参照に基づく信号補正、アーティファクト低減が含まれ、その後、試行の平均化、アトラスへの位置合わせ、関心領域の解析を行う。イメージングは無傷の頭蓋を通して実施されるため、同一個体で長期間にわたり反復的な縦断測定が可能となる。本アプローチは再現性があり、費用対効果に優れ、皮質生理および神経疾患の研究に適応可能である。

https://doi.org/10.64898/2026.05.14.725112