背景 クリミア・コンゴ出血熱ウイルス（CCHFV）はマダニ媒介のナイロウイルスであり、流行地域では重篤なヒト疾患を引き起こす。承認された抗ウイルスは広く利用可能ではない。抗ウイルス創製は、BSL-4（バイオセーフティレベル4）の封じ込め条件下で真正のCCHFVを扱う必要があるため制約されており、より低封じ込めのプラットフォームが求められている。ここでは、CCHFV糖タンパク質に基づくBSL-2擬似型ウイルスを用いたベシキュラー・ストマト炎ウイルス（VSV）スクリーニングワークフローが、真正のCCHFVに対する抗ウイルス活性をもつ低分子侵入阻害薬の同定を可能にするかを評価した。
方法 複製不能なVSV擬似型であって、CCHFV糖タンパク質を担持したものを用い、抗ウイルス化合物186種のライブラリをスクリーニングした。選抜化合物は、添加タイミング実験およびCCHFV糖タンパク質を介した細胞間融合アッセイにより、ウイルス侵入への影響を評価してさらに特性化した。その後、選抜化合物の抗ウイルス活性は、BSL-4条件下でZsGreen1を発現する真正の組換えCCHFVに対して、蛍光ベースおよびフォーカス形成アッセイにより評価した。
結果 BSL-2でのスクリーニングにより、エルトロンボパグオラミンおよびケルセチンがCCHFV糖タンパク質を介した侵入の阻害薬であることが示された。両化合物はいずれも、ウイルス曝露中および侵入の初期段階で存在していたときに最大の阻害活性を示し、さらにCCHFV糖タンパク質を介した細胞間融合も低下させた。重要な点として、エルトロンボパグオラミンおよびケルセチンはBSL-4条件下での真正の組換えCCHFVも阻害し、蛍光ベースおよびフォーカス形成の双方のアッセイにより独立に抗ウイルス活性が確認された。
結論 本結果は、BSL-2のVSV擬似型システムと、BSL-4条件下での真正ウイルスによる検証とを結びつける、実用的なCCHFV侵入スクリーニングワークフローを確立するものである。エルトロンボパグオラミンおよびケルセチンの同定は、CCHFV侵入阻害のさらなる検討に向けた低分子候補を提示し、本ワークフローがCCHFV抗ウイルス創製に有用であることを示す。
https://doi.org/10.64898/2026.08.28.747751