通常は折り畳まれたタンパク質の一時的に変性した状態への薬理学的シャペロンの結合親和性を定量化する

部分的または完全に変性したタンパク質へのリガンドの結合は、細胞性および薬理学的シャペロンの機構において重要な役割を担い、適切な折り畳みを促進しうる。しかし、ネイティブな折り畳みを不安定化させるために一般的に用いられる方法はリガンド結合にも影響するため、通常は折り畳まれているタンパク質の変性状態に対するリガンドの結合親和性を定量化することは困難である。本研究では、溶液条件を変えずに単一タンパク質分子を単分子力分光によりほどき、変性状態へのリガンド相互作用を観測した。抗プリオン薬理学的シャペロンとして既に、プリオンタンパク質のネイティブ状態と部分的または完全に変性した状態の双方と相互作用することが示されているペントサン多硫酸（PPS）に注目し、光学トラップ中で保持したバンクボル・プリオンタンパク質（BvPrP）分子のコンフォメーション動力学に対するPPS結合の濃度依存的な影響を測定した。PPSは、BvPrPの特定の部分的にほどけた中間状態だけでなく、完全に変性した状態も安定化することを見いだした。さらに驚くべきことに、PPS濃度を下げるほど、折り畳まれた状態よりも変性した状態へ結合する傾向が増大し、変性状態への親和性がより高いことが示された。変性状態と折り畳み状態への結合量の相対比から、PPSはプリオンタンパク質（PrP）の変性状態へ、ネイティブ状態よりもおよそ100倍強く結合することが見積もられた。これらの結果は、プリオンの誤った折り畳みと伝播における変性状態の重要性を裏づける。より一般には、寿命の短い不安定状態への結合親和性をどのように推定できるかを示している。

https://doi.org/10.64898/2026.08.27.747683